諾氟沙星含量測定

點(diǎn)擊次數(shù)：5180 發(fā)布時(shí)間：2012-03-30

一、實(shí)驗(yàn)方法

Cometro液相色譜系統(tǒng)；

紫外檢測器波長：278nm；

Kromasil C₁₈ 250*4.6mm 5u 色譜柱；

柱溫：25℃；

流動(dòng)相：0.025mol/L磷酸溶液（用三乙胺調(diào)pH=3.0）：乙腈=87:13；

流速：1.00ml/min；

諾氟沙星對照品-0.15mg/ml，樣品；

進(jìn)樣量：對照品分別進(jìn)樣5ul，7.5ul，10ul，12.5ul，15ul各3次，樣品進(jìn)樣10ul，使樣品與標(biāo)準(zhǔn)品1:1混合再進(jìn)樣10ul，考察線性相關(guān)性，保留時(shí)間重現(xiàn)性，回收率。

二、譜圖結(jié)果

附進(jìn)樣量，保留時(shí)間，峰面積關(guān)系表：

三、結(jié)果運(yùn)算

1、保留時(shí)間重現(xiàn)性考察：

2、線性相關(guān)性考察及樣品含量計(jì)算：

以標(biāo)準(zhǔn)品進(jìn)樣量為橫坐標(biāo)，峰面積為縱坐標(biāo)，得線性方程：

由此可算出樣品中諾氟沙星含量0.1205mg/ml。

3、回收率考察：

根據(jù)上面線性方程可算出混合后樣品含諾氟沙星0.1342mg/ml，而實(shí)際真值是0.1352mg/ml，因此得回收率為99.20%。

四、綜述

1、此三項(xiàng)考察綜合考察了Cometro 6000 PVW UV/VIS檢測器的吸收穩(wěn)定性，Cometro 6000 LDI泵的流量性，進(jìn)樣伐、進(jìn)樣針的性，Kromasil色譜柱的性。

2、本實(shí)驗(yàn)流動(dòng)相中三乙胺看似作用是調(diào)節(jié)pH，其實(shí)際zui大作用是調(diào)整峰型，因?yàn)橹Z氟沙星有含氮性基團(tuán)，在酸性環(huán)境中容易與色譜柱中的硅羥基產(chǎn)生靜電作用而拖尾，如下圖：

而三乙胺可以代替物質(zhì)與硅羥基作用，了物質(zhì)的峰型。因此調(diào)節(jié)pH時(shí)候得注意三乙胺的加入量，不能過少，可以直接加入適量三乙胺，再用磷酸調(diào)節(jié)pH。

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